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第164章实验正式开始(第1/2页)
江河今日,提前下班。
医院这边的子弹,且让它先飞一会儿。
回学校推进科研项目去。
重症急性胰腺炎的论文已经发出,接下来的重头戏,是miRNA早筛。
这玩意做出来,是真正能撼动全世界的核武器,更是他前世今生执念的所在:
——攻克胰腺癌,从极早期的精准筛查开始。
返回南医大的公交车,江河在项目组的QQ群里发了一条消息。
「所有人,一小时後,实验室开会。」
实验室。
江河进去的时候,众人都乖巧坐着。
「老大。」易向晚道,「你不是上班麽?怎麽这会儿就回来了?没有迎新聚餐什麽的?」
「聚餐没有,倒是给我排了十五张重症床位。」
「啊,十五张?附一院现在把新人当牲口使啊?」
「没事,不用管医院那边,今天喊你们过来,是因为我们前期收集的几百份冻存血清样本已经全部到位了,miRNA早筛项目,从今天开始,正式进入湿实验阶段。」
此话一出,几个人的神色瞬间变得严肃。
跟江河混了这麽久,他们很清楚这个项目的分量。
江河从包里拿出一沓列印好的A4纸,分发给众人。
「这是我这两天做出来的实验方案,大家先看一看。」
众人接过方案,低头翻阅。
江河:「这个项目的前景有多大,我以前跟你们说过,但我今天必须给你们打个预防针,这个过程,会极其枯燥,且充满挫折。」
「简单来说,我们要在血液里,找到与肿瘤相关的miRNA,目前,针对血清miRNA的商业化提取试剂盒还不够成熟,我们只能用最基础的方法来做。」
江河站起身,走到白板前,拿起马克笔画了一个简单的流程图。
「第一步,RNA提取,这是最耗时的一步,也是你们未来几个月每天都要重复的工作。」
「我们手头有近六百份血清样本,我要求你们使用TrizolLS试剂法来进行提取,因为血清中本身存在大量的RNase(核糖核酸酶),如果不迅速裂解,我们的目标RNA就会降解得一乾二净。」
「记住几个核心要点。」
「第一,绝对的无酶环境,我们的枪头、EP管必须是去RNA酶处理过的,台面每天实验前用RNaseZap喷洒後,再用DEPC水擦拭。」
「第二,加氯仿後的相分离,离心完,吸取上层水相的时候,手千万不要抖,哪怕少吸一点水相,也绝不能吸到中间的白色蛋白层,一旦污染,後面的数据全废。」
唐培认真地在方案上做着笔记:「老大,提取完之後呢?」
「提取完之後,是逆转录(RT)和实时萤光定量PCR(qPCR)。」
江河写下了一个数学公式。
「这是相对定量的计算公式,但因为miRNA太短了,只有大约22个核苷酸,传统的随机引物根本无法对其进行逆转录,所以,我们需要在逆转录之前,进行Poly(A)加尾,或者使用特异性的茎环(Stem-loop)引物。」
「现阶段,我们用最基础的加尾法,这些长周期、重复性的基础提取和建库工作,我今天全部分配下去,两人一组,轮班倒,一个月内,我要看到这六百份样本的A文库全部建立完毕,听明白了吗?」
顾亦舟严肃点头:「没问题老大,交给我们。」
江河看着手里的实验方案,突然想到副院长张随。
张随是美国约翰·霍普金斯大学医学院的博士後。
在08年,全球范围内在miRNA循环标志物领域走得最前沿的,除了哈佛的几家附属医院,就是约翰·霍普金斯的肿瘤学团队。
他们是江河这个项目在国际上最大的竞争对手。
想要在国际顶刊上抢发标准,光有数据有时候是不够的。
如果能借用张随在霍普金斯大学的人脉网络,比如让他作为通讯作者之一与国外同行进行学术沟通。
这篇文章在投向《柳叶刀·肿瘤学》或者《新英格兰医学杂志》时,面临的阻力会小得多。
不过,这些都是後话。
打铁还需自身硬,先把数据跑出来再说。
江河收回思绪。
「好了,戴上手套,我现在带你们做第一批样本的提取演示,所有人盯紧我的操作细节。」
接下来的两个小时,实验室里热火朝天。
江老师事无巨细,教学非常认真。
加入TrizolLS,加入氯仿,4度离心机设定。
围观的几个人眼睛都不眨一下。
他们跟着江河做了几次科研了,举手投足间已经有了一丝老实验员的沉稳。
演示结束,江河将样本放进-80度超低温冰箱。
「就按这个标准来,今晚先做十个样本练手,明天下班我会过来查你们的纯度数据。」
「休息十分钟。」
休息时间。
程溪瑶从柜子里抱出几瓶矿泉水发给大家,然後快步走到江河身边,掏出笔记本。
「老大,跟你汇报一下我的进度。」
「宫颈糜烂那个?」
「嗯,推进得非常顺利!这段时间没课的时候,我跑了羊城大学城的三所高校,一共收回了四百份有效问卷,你猜结果怎麽样?」
「很夸张?」
「对,简直是触目惊心,在这四百个女生里,有接近10%的人曾经在校外的私立诊所被诊断为重度宫颈糜烂,而在这部分人里,有高达70%的女生接受了抗生素输液、微波理疗甚至利普刀手术,她们花了几个月的生活费,去治一个根本不存在的病,很多人甚至因此产生了严重的心理负担,觉得自己……不乾净。」
「下一步你打算怎麽做?」江河问。
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「我已经联系了附一院妇产科的一位副教授,她对我的流调数据很感兴趣,愿意指导我写一篇综述。」
程溪瑶擡起头,满脸期待:「老大,等这篇综述写完,我打算把它拆解成通俗易懂的科普长文,先发在南医大的校报和BBS上,我们要让所有女生都知道,宫颈柱状上皮异位是正常的生理现象!」
「没问题,科普文章的行文注意通俗化,少用专业术语,多用类比,写好之後可以先拿给我看看。」
「好嘞!谢谢老大!」
程溪瑶十分高兴。
这可是她自己的项目。
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